Старая версия сайта | Untitled Document

Внимание!!! Вы находитесь на старой версии сайта. Новая версия доступна по адресу www.rospotrebnadzor.ru

Б.Ф. Вачаев, Э.А. Яговкин, Г.Г. Онищенко, Н.В. Медуницын, А.П. Шепелев,
Т.В. Белик, И.Л. Юрьева, С.В. Головина, В.В. Алешня, Г.Ф. Лазикова, Р.П. Чупрынина,
Т.И. Немировская, Н.И. Храмова, Т.М. Каргина, Р.А. Волкова, М.Э. Яговкин., Г.В. Хмелевская, И.С. Королева.

СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗРАБОТКИ ОТЕЧЕСТВЕННОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ГЕМОФИЛЬНОЙ ИНФЕКЦИИ.

Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии, Государственный институт стандартизации и контроля им. Л.А. Тарасевича, г. Москва, Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Министерства здравоохранения и со-циального развития РФ, г. Москва, Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии, г.Москва.

Исследованиями, проведенными в ряде регионов России показано, что инфекция, вызываемая Haemophilus influenzae, актуальна для нашей страны.

Во многих странах мира проблема Hib инфекции решена введением в календарь прививок специфической вакцинации детей с двухмесячного возраста. В России вакцины против Hib инфекции не разработано. В рамках реализации ФЦП «Предупреждение и борьба с заболеваниями социального характера», подпрограмма «Вакцинопрофилактика» развернуты работы по созданию отечественной промышленной технологии получения гемофильной вакцины.

В ходе выполнения программы разработаны два варианта вакцины: гемофильная тип «b» химическая сухая; гемофильная тип «b» конъюгированная сухая. Всестороннее изучение вакцин в лабораторных условиях показало их малую реактогенность, безопасность и антигенную активность, на основании чего Министерство здравоохранения РФ разрешило проведение клинических испытаний двух вариантов вакцин на ограниченной группе взрослых добровольцев.

В данном сообщении представлены материалы по изучению реактогенности, безопасности и антигенной активности гемофильных вакцин при проведении клинических испытаний на ограниченной группе взрослых добровольцев.

Материалы и методы.

Клинические испытания проводились в соответствии с международными требованиями, отраженными в стандарте отрасли «Правила проведения качественных клинических испытаний в Российской Федерации», утвержденным Министерством здравоохранения РФ.

В испытаниях приняли участие 55 человек в возрасте от 18 до 40 лет, сформированных в 3 группы.

Группа I – прививались экспериментальной вакциной гемофильной тип «b» химической сухой – 19 чел.

Группа II–прививались экспериментальной вакциной гемофильной тип «b» конъюгированной сухой – 17 чел.

Группа III- прививались коммерческой вакциной АКТ-ХИБ (Авентис Пастер Франция) – 19 чел.

Коммерческая вакцина АКТ-ХИБ хорошо зарекомендовала себя в длительных эпидемиологических испытаниях, зарегистрирована в России и служила препаратом сравнения.

У испытуемых до и после вакцинации изучались: местные проявления вакцинации, состояние жизненно важных органов и систем организма (сердечно-сосудистой, нервной системы, печени, почек, крови, иммунной системы).

Результаты и обсуждение.

По результатам проведенных исследований все используемые вакцины вызывали у испытуемых слабую температурную реакцию. В среднем температура повышалась в первые 2 суток у 1–3 испытуемых на 0,1-0,5° и не превышала пределов 37°-37,3°, возвращаясь к исходной через 1-2 дня. Состояние сердечно-сосудистой системы, по данным ЭКГ, было без изменения по сравнению с состоянием до вакцинации.

При обработке данных, связанных с регистрацией местных реакций, анализировали частоту наличия покраснения и инфильтрата. Кроме местных проявлений в области инъекции учитывалась болезненность, припухлость, наличие абсцессов. Учитывалось увеличение лимфатических узлов.

По характеру местных проявлений экспериментальные вакцины были равнозначными. У прививаемых отмечалась быстропроходящая болезненность в месте введения. При вакцинации АКТ-ХИБ вакциной также отмечалась быстропроходящая болезненность в месте введения, но по сравнению с I и II группой у вакцинированных III группы отмечалась более выраженная реакция со стороны региональных лимфоузлов без признаков выраженного воспаления, что расценивалось нами как результат более интенсивного воздействия вакцины на иммунную систему.

Иммунизация экспериментальными и коммерческой вакцинами не оказывала значимого влияния на гематологические показатели. При вакцинации тремя вакцинами отмечалось некоторое увеличение числа лимфоцитов, моноцитов и незначительное снижение палочкоядерных нейтрофилов по сравнению с фоном, но эти изменения не выходили за пределы физиологической нормы.

Биохимические параметры, характеризующие функции почек, печени, сердца и других жизненно важных органов и являющиеся важными показателями вакцинального процесса, не выявили отклонений от физиологических норм показателей, которые свидетельствовали бы о токсических воздействиях испытуемых вакцин.

Учитывая, что при вакцинации могут иметь место связанные с изменением иммунореактивности вакцинированного побочные иммунологические эффекты, свидетельствующие о нарушении иммунного гомеостаза, изучались показатели, характеризующие состояние Т- и В- клеточного звеньев иммунитета до и после вакцинации.

Как свидетельствуют результаты, представленные в таблице 1, отмечена стимуляция Т-клеточного звена иммунной системы при вакцинации как

Таблица 1

Состояние Т-клеточного звена иммунного статуса добровольцев при иммунизации гемофильными вакцинами.

Изучаемые параметры | Показатели нормы | Группа I Вакцинация ХИБ-вакциной химической (экспериментальная) | Группа II Вакцинация ХИБ-вакциной конъюгированной (экспериментальная) | Группа III Вакцинация АКТ-ХИБ вакциной (коммерческая)
До вакцинации M± m | После вакцинации M± m | До вакцинации M± m | После вакцинации M± m | До вакцинации M± m | После вакцинации M± m
Т-клетки (маркер CD 3) (10 9 /л абсол. кол-во, % | 60-80% | 1315,8±289,2 63,6±3,68 | * 1589±420,7 71,1±4,71 | 1110±338,56 64,2±8,64 | * 1706,4±304,33 64,2±8,64 | 1186,3±357,43 66,5±2,79 | * 1673,7±309,71 72,8±4,25
Т-хеллеры (маркер CD 4) абсол. кол-во, % | 36-54% | 821,6±189,4 39,7±3,48 | * 1050,7±299,2 46,9±4,54 | 794,8±179,5 46,2±4,89 | * 1174,7±172,9 49,7±5,05 | 760,4±219,7 43,4±4,32 | * 1089,5±254,8 47,1±3,78
Т-супрессоры (маркеры CD 8) абсол.кол-во, % | 19-27% | 487,5±104,59 23,6±2,14 | 533,1±142,83 23,9±2,44 | 399,4±131,31 23,1±3,64 | 577,1±156,94 23,8±3,64 | 435,2±158,7 24,0±2,82 | 584,6±140,0 25,5±3,4
Соотношение CD 4/ CD 8 | 1,5-2,5 | 1,71±0,25 | * 2,01±0,35 | 2,09±0,47 | * 2,17±0,44 | 1,87±0,41 | * 1,92±0,36
Т-киллеры (маркер CD 16) абсол. кол-во, % | 9-16% | 268,2±78,20 13,1±3,28 | 353,5±143,2 15,4±3,47 | 187,9±87,5 10,9±3,43 | * 396,0±111,46 16,5±3,97 | 210,2±85,95 11,9±3,16 | * 419,5±113,77 18,3±3,64

Примечание: * - статистически значимые различия до и после вакцинации (Р < 0,05).

экспериментальными, так и коммерческой вакциной сравнения по общему содержанию Т-клеток, Т-хелперов, соотношению Т-хелперов/Т-супрессоров. При этом не отмечалось значимых повышений Т-супрессорных клеток. Отмечалось также повышение количества Т-киллерных лимфоцитов при иммунизации тремя вакцинами. Регистрируемые уровни повышения количества Т-клеток не выходили за рамки физиологической нормы.

Показатели, характеризующие В-клеточное звено, представленные в таблице 2 свидетельствовали о том, что в группах I и II привитых экспери-ментальными вакцинами, отмечалось незначительное статистически значимое увеличение В- лимфоцитов. У привитых коммерческой вакциной увеличения количества В-клеток не отмечалось. По нашему мнению, это может быть связано с особенностями иммуногенеза препаратов, конъюгированных разными методическими приемами.

У добровольцев, вакцинированных экспериментальными и коммерческой вакцинами, отмечалось равнозначное увеличение иммуноглобулинов классов А, G, М. Уровень общего иммуноглобулина Е, являющегося одним из показателей аллергизации организма, не повышался.

По результатам образования циркулирующих иммунных комплексов, представленных в таблице № 3, отмечено незначительное повышение их уровня после вакцинации по сравнению с уровнем до вакцинации, практически соответствующее показателям физиологической нормы.

Подводя итог результатам изучения иммунологической безопасности вакцин, можно сделать вывод, что вакцинация экспериментальными и коммерческой вакцинами приводит к адекватной реакции иммунной системы без отрицательного воздействия на клеточные и гуморальные системы иммунитета, которые могли бы привести к срыву физиологической нормы.

Антигенные свойства вакцин по содержанию специфических к PRP антител в сыворотках крови добровольцев через 20 дней после введения сравниваемых препаратов, определяли, используя ИФА тестсистему фирмы Фулекс (США).

Таблица 2

Состояние В-клеточного звена иммунного статуса добровольцев при иммунизации гемофильными вакцинами

Изучаемые параметры | Показатели нормы | Группа I Вакцинация ХИБ-вакциной химической (экспериментальная) | Группа II Вакцинация ХИБ-вакциной конъюгированной (экспериментальная) | Группа III Вакцинация АКТ-ХИБ вакциной (коммерческая)
До вакцинации M± m | После вакцинации M± m | До вакцинации M± m | После вакцинации M± m | До вакцинации M± m | После вакцинации M± m
В-клетки (маркер CD 20) |  | 296,6±92,17 | * 432,6±124,6 | 248,9±93,9 | * 450,5±120,12 | 301,2±165,3 | 386,1±117,2
Абсол. кол-во, % | 10-23% | 14,3±3,56 | * 19,5±3,15 | 14,4±3,63 | * 18,8±3,60 | 15,9±4,60 | 16,6±3,50

Примечание: * Статистически значимые различия до и после вакцинации.

Таблица 3.

Содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК)

у добровольцев при иммунизации гемофильными вакцинами.

Наименование препаратов | Содержание ЦИК (у.е.)
До вакцинации M± m | После вакцинации M± m
1. Вакцина Hib экспериментальная ( I группа). Уровень прироста | 87,3±21,5 | 107±23,9 +19,7
2. Вакцина Hib экспериментальная ( II группа). Уровень прироста | 88,7±14,63 | 94,6±14,10 +5,9
3. Вакцина Hib коммерческая ( III группа). Уровень прироста. | 92,5±24,5 | 112,2±25,7 +19,7
Показатель нормы | 30-100 у.е. |

Оценку антителопродукции осуществляли в соответствии с международными критериями: уровень антител к PRP < 0,15 мкг/мл считался как незащитный, уровень і 0,15 мкг/мл как условно-защитный: уровень і 1 как показатель стойкой защиты. Результаты представленные на рис. 1, свидетельствовали, что экспериментальная конъюгированная вакцина по уровню сероконверсии была равнозначна коммерческой АКТ-ХИБ-вакцине: 93,8 % и 100 % сывороток соответственно имели уровень антител к PRP і 1 мкг/мл. Данный уровень соответствует требованию ВОЗ к гемофильным вакцинам. Экспериментальная химическая вакцина была менее эффективной, обеспечивая в 68,4 % уровень антител стойкой защиты.

При характеристике титров антител к PRP наибольшая эффективность наблюдалась при вакцинации коммерческой АКТ-ХИБ вакциной (от 7,0 до 17 мкг/мл). Меньший, но достаточно высокий титр наблюдался у привитых экспериментальной конъюгированной вакциной (от 4,6 до 13 мкг/мл).

Нельзя не отметить, что у части добровольцев до вакцинации отмечался достаточно высокий уровень антител к Hib, что свидетельствует о распространенности циркуляции возбудителя, возможно создающей достаточную иммунную прослойку у взрослых к этой инфекции.

В ходе выполнения исследований параллельно разрабатывались иммунобиологические препараты для лабораторной диагностики Hib инфекции: завершены государственные испытания и рекомендованы для практического применения стимулятор роста для гемофильных микробов; разработаны диагностические системы для выявления антигена и антител с использованием метода ИФА и латексагглютинации, в том числе с использованием моноклональных антител.

Выводы:

1. По результатам ограниченных клинических испытаний на взрослых добровольцах экспериментальные отечественные гемофильные вакцины могут быть признаны как слабореактогенные и безопасные.

2. Предпочтение следует отдать экспериментальной конъюгированной гем-фильной вакцине.

3. Следующий этап должен включать испытания вакцины на детском контингенте.

Контактное лицо:

Яговкин Эдуард Александрович,

344010, г. Ростов-на-Дону, пер. Газетный 119.

тел. (863)234-91-84

РЕЗЮМЕ

Представлены материалы проведения клинических испытаний на ограниченной группе взрослых добровольцев от 18 до 40 лет двух вариантов экспериментальных отечественных вакцин: гемофильной тип «b» химической сухой и гемофильной тип «b» конъюгированной сухой. Препаратом сравнения служила коммерческая вакцина АКТ-ХИБ (Авентис Пастер, Франция), хорошо зарекомендовавшая себя в длительных эпидемиологических испытаниях и зарегистрированная в России.

По результатам испытаний экспериментальные отечественные вакцины признаны слабореактогенными и безопасными. Предпочтение отдано экспериментальной конъюгированной вакцине.